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秋季實(shí)驗(yàn)室又迎來了一波實(shí)驗(yàn)新（sha）手，每年的迎新，都讓師兄師姐們百感交集，恨不得把注意事項(xiàng)貼遍實(shí)驗(yàn)室，新人實(shí)驗(yàn)時(shí)也總是提心吊膽，生怕會(huì)出什么問題。你是否曾經(jīng)被新來的萌新深深坑到慘，我們集錦了生物實(shí)驗(yàn)必背知識(shí)點(diǎn)。

一、PCR 擴(kuò)增目的基因

問：第一次帶師弟做 PCR，準(zhǔn)備擴(kuò)一段目的基因，師弟熟門熟路地從移液器支架上取下了 2.5μL 和 100μL 的 research plus 放到了桌上躺平。那一刻內(nèi)心強(qiáng)烈 OS：我那寶貴的槍是你能隨便躺平的嗎？

實(shí)驗(yàn) Tips：

（1）使用移液器前，先準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)材料，PCR 實(shí)驗(yàn)需要低溫，因此務(wù)必將模板、酶等實(shí)驗(yàn)材料在冰上操作；

（2）使用移液槍時(shí)選擇帶濾芯的槍頭，防止交叉污染；

（3）如果退火溫度尚未確定，試試在 Tm 值附近 5℃ 的范圍，溫度由高到低進(jìn)行測(cè)試，即可以估算出Z佳退火溫度。

Eppendorf Mastercycler X50 PCR 熱循環(huán)儀有 2-D 梯度技術(shù)，可一步完成高級(jí) PCR 優(yōu)化，同時(shí)快速確定Z佳產(chǎn)率和特異性條件，趕緊去實(shí)驗(yàn)室探索下這臺(tái)「神器」，如果有，你未來的漫漫實(shí)驗(yàn)之路就能輕松很多。

二、感受態(tài)細(xì)胞制備

問：有一次，我?guī)熋米龈惺軕B(tài)細(xì)胞，師妹說她知道感受態(tài)細(xì)胞，但她一直是購買的商品化的 DH5α 感受態(tài)細(xì)胞，看來是不知道有些實(shí)驗(yàn)室感受態(tài)是自己制備的。

實(shí)驗(yàn) Tips：

（1）要密切關(guān)注細(xì)菌的生長(zhǎng)狀態(tài)，多次轉(zhuǎn)接或者儲(chǔ)存于 4℃ 的細(xì)菌就不要用啦；

（2）操作在冰上進(jìn)行且保證環(huán)境無菌，記住感受態(tài)細(xì)胞是很脆弱的，用槍吹打時(shí)要溫柔的對(duì)待它哦；

（3）提前預(yù)冷離心機(jī)，否則臨到使用再打開的話，又要白白浪費(fèi)寶貴的實(shí)驗(yàn)時(shí)間了。

Eppendorf 5425 R 冷凍離心機(jī)，在 8 分鐘內(nèi)即可完成預(yù)冷進(jìn)入工作狀態(tài)（21 °C 至 4 °C），1/4 圈快速開/關(guān)蓋，操作巨簡(jiǎn)單！快找到實(shí)驗(yàn)室的冷凍離心機(jī)，貼上提醒預(yù)冷的標(biāo)簽吧。

三、細(xì)胞培養(yǎng)

問：實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞房一直很干凈，可是上次來新人后，細(xì)胞培養(yǎng)箱里面菌落養(yǎng)的比細(xì)胞還要好

實(shí)驗(yàn) Tips：

（1）細(xì)胞房的規(guī)范不僅要貼在墻上更要記在心里，規(guī)范的管理才有可靠的實(shí)驗(yàn)哦；

（2）超凈臺(tái)/生物安全柜內(nèi)的設(shè)備和耗材務(wù)必合理分區(qū)，避免混亂造成不必要的污染；

（3）需要無菌操作的步驟要尤其注意，酒精千萬不能?。?/span>

（4）二氧化碳培養(yǎng)箱需要定期清潔和高溫消毒，其次向培養(yǎng)箱承液盤里加入的液體一定要保證是無菌。

Eppendorf C170i 二氧化碳培養(yǎng)箱，有效幫助避免細(xì)胞污染。箱體無死角，全部結(jié)構(gòu)支持快拆，自帶 180℃ 高溫消毒系統(tǒng)。不用總是擔(dān)心細(xì)胞污染啦，定期清潔，實(shí)驗(yàn)無憂。