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2023-10-09 16:06:52
作者: 高思維醫(yī)療
1981
酶聯(lián)免疫法是目前很常用的免疫學(xué)方法,實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化要求用酶聯(lián)免疫法測(cè)定抗原或抗體時(shí),不論是定量還是定性都要求使用酶標(biāo)測(cè)定儀進(jìn)行測(cè)定,測(cè)定時(shí)需要選擇單波長(zhǎng)或雙波長(zhǎng)。那酶標(biāo)測(cè)定儀單波長(zhǎng)和雙波長(zhǎng)怎么選擇?
選擇單波長(zhǎng)測(cè)定就是選擇一個(gè)測(cè)定波長(zhǎng),直接測(cè)定樣本的吸光度,而雙波長(zhǎng)測(cè)量是采用兩個(gè)不同的波長(zhǎng),即測(cè)定波長(zhǎng)(又叫主波長(zhǎng))和參比波長(zhǎng)(又叫次波長(zhǎng))同時(shí)測(cè)定樣品的吸光度,以消除一些外在影響因素,提高測(cè)定結(jié)果的精密度和準(zhǔn)確度,但在日常工作中往往忽略對(duì)單波長(zhǎng)和雙波長(zhǎng)的選擇。
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酶標(biāo)測(cè)定儀利用光電比色原理,與酶免試劑配套使用,可用于臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)樣本吸光度,進(jìn)行酶聯(lián)免疫學(xué)相關(guān)分析。
1.具有吸光度、定性、定量分析功能。
2.具有單、雙波長(zhǎng)和單、雙孔兩種檢測(cè)方式供用戶選擇。
3.全中文界面,人機(jī)對(duì)話方式的菜單操作系統(tǒng),操作簡(jiǎn)單。
4.報(bào)告方式:
定性:樣本吸光度、S/CO值、臨界值及陰陽(yáng)性判定結(jié)果;
定量:樣本吸光度、樣本濃度值、正常參考值及檢測(cè)判定結(jié)果。
5.輸出為96孔整板檢驗(yàn)結(jié)果。
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酶標(biāo)測(cè)定儀波長(zhǎng)比較:
酶標(biāo)測(cè)定儀在用單波長(zhǎng)測(cè)定吸光度時(shí),除受到測(cè)定干擾(樣本的濁度、干擾色等)和電路干擾(包括噪音、漂移、電壓等)等因素外,受液體表面張力的影響也很大。在檢測(cè)過(guò)程中,由于液體表面張力的作用,液體的表面不是一個(gè)平面,而是形成一個(gè)凹面,從側(cè)面看似凹透鏡,這樣不可避免會(huì)影響光路的正常通過(guò)。由于凹液面的影響,光線在通過(guò)液體時(shí),除正常被液體吸收一部分外,尚有部分被折射和反射(如光線通過(guò)凹透鏡那樣),影響吸光度的檢測(cè)。而酶標(biāo)測(cè)定儀使用的又是通過(guò)光導(dǎo)纖維傳播的點(diǎn)光源,如果每次能在同一部位檢測(cè),吸光度的重復(fù)性將得到保證,但由于機(jī)械運(yùn)動(dòng)等造成的誤差,不可能保證每孔都在相同部位被檢測(cè),因此造成了孔與孔之間有一定的差異。
雙波長(zhǎng)的測(cè)定采用兩個(gè)不同的波長(zhǎng)同時(shí)測(cè)定一個(gè)樣本的吸光度,它們的差值是樣本相對(duì)準(zhǔn)確的吸光度,這樣就大大減少了測(cè)定干擾和電路干擾,因此測(cè)定結(jié)果明顯好轉(zhuǎn)。
在酶聯(lián)免疫法測(cè)定抗原、抗體時(shí),常用的底物四甲基苯胺或鄰苯二胺,顯色終止后,在630nm處的吸光度值都只有在450nm處吸光度值1%左右,因此利用雙波長(zhǎng)檢測(cè)不會(huì)影響靈敏度,反而可以減少其他因素的影響。建議酶聯(lián)免疫法比色首選雙波長(zhǎng),這樣可以提高臨界值附近標(biāo)本結(jié)果判定的準(zhǔn)確度,減少實(shí)驗(yàn)誤差。


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