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美國(guó)伯樂 GelDoc Go 凝膠成像系統(tǒng)熒光信號(hào)弱的問題（例如核酸凝膠中的 EB、SYBR? Safe，或蛋白凝膠中的熒光標(biāo)記），可按以下步驟由簡(jiǎn)入繁進(jìn)行排查和解決。

GelDoc Go 使用的是 LED 紫外/藍(lán)光（壽命長(zhǎng)，但亮度仍可能因老化或設(shè)置問題下降），且采用固定光圈鏡頭。信號(hào)弱通常與激發(fā)光強(qiáng)度、濾光片匹配、曝光參數(shù)或樣品本身相關(guān)。

一、檢查成像模式與光源設(shè)置

1、錯(cuò)誤的光源模式：GelDoc Go 需要明確選擇對(duì)應(yīng)的激發(fā)光源。

（1）核酸凝膠（EB、GelRed、SYBR Safe）→ 應(yīng)選 UV（302 nm）或 藍(lán)光（藍(lán)光適用于 SYBR Safe 等染料）。

（2）如果誤用白光（White trans），則無(wú)法激發(fā)熒光。

（3）在 Image Lab 軟件中選擇正確的 “應(yīng)用” 模板，或手動(dòng)設(shè)置光源。

2、濾光片位置：GelDoc Go 內(nèi)部濾光片轉(zhuǎn)輪需匹配熒光染料。常見配置：

（1）EB / GelRed → 使用 605 nm 帶通濾光片（橙色/紅）。

（2）SYBR Safe → 建議使用 530 nm 綠光濾光片。

（3）檢查軟件中是否選擇了正確的濾光片位置，若濾光片卡住或未到位，信號(hào)會(huì)極弱。

二、調(diào)整曝光與增益參數(shù)

1、曝光時(shí)間過短：默認(rèn)自動(dòng)曝光可能因背景過高而提前終止。

（1）改為 手動(dòng)曝光，逐步增加時(shí)間（1s、5s、10s，甚至更長(zhǎng)，如 30-60s）。

（2）觀察實(shí)時(shí)預(yù)覽，直到條帶清晰可見。

2、增益（度）：在 Image Lab 的“采集”設(shè)置中，提高 增益 值（通常 1-10 倍），可增強(qiáng)弱信號(hào)，但會(huì)增加背景噪音。

3、信號(hào)平均：開啟“信號(hào)平均”（2-4 次）可改善信噪比，但會(huì)使成像時(shí)間延長(zhǎng)。

三、檢查樣品與染色效率

1、熒光染料濃度或染色時(shí)間不足：

（1）核酸凝膠：確認(rèn)染料加入量正確（如 EB 終濃度 0.5 μg/mL），染色時(shí)間足夠（20-30 分鐘，或按染料說明書）。

（2）蛋白凝膠：如果是熒光染色（如 SYPRO Ruby），確保固定和染色步驟充分，洗滌時(shí)間不要過長(zhǎng)。

2、DNA 上樣量過低：嘗試增加 2-3 倍上樣量，或重新電泳加載已知陽(yáng)性對(duì)照。

3、凝膠厚度與緩沖液：過厚的凝膠（>1 cm）會(huì)吸收激發(fā)光；電泳結(jié)束后未用新鮮 buffer 平衡，殘留的 SDS 或 EDTA 可能抑制某些熒光染料。

四、清潔光學(xué)元件及樣品臺(tái)

1、鏡頭和濾光片窗口：用鏡頭紙或柔軟棉布蘸取無(wú)水乙醇輕輕擦拭鏡頭外表面，以及樣品臺(tái)內(nèi)部的保護(hù)玻璃?；覊m或污漬會(huì)散射光線，降低信號(hào)。

2、LED 光源窗口：GelDoc Go 的紫外/藍(lán)光 LED 陣列上方有一層保護(hù)玻璃，若沾有凝膠碎屑或緩沖液結(jié)晶，應(yīng)小心清潔。

（1）注意：清潔前務(wù)必關(guān)閉電源，避免紫外傷害。

（2）使用蒸餾水濕潤(rùn)的無(wú)塵布擦拭，再用鏡頭紙擦干。

五、預(yù)防建議

1、每次使用前檢查凝膠有無(wú)氣泡或裂痕。

2、不要過度洗滌熒光染色的凝膠。

3、定期（每月）用熒光參考片驗(yàn)證光源一致性。