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2026-07-13 09:27:29
作者: 高思維醫(yī)療
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對(duì)于NanoDrop這類超微量分光光度計(jì),“樣品與參比液弄反”通常指在空白校正(Blank)步驟中,誤將樣品溶液當(dāng)作空白液進(jìn)行校正。這會(huì)導(dǎo)致后續(xù)所有測(cè)量數(shù)據(jù)的基準(zhǔn)錯(cuò)誤,結(jié)果毫無(wú)意義。
一、錯(cuò)誤的后果:數(shù)據(jù)不可用
空白校正的目的是建立一個(gè)“零”基準(zhǔn),以扣除溶劑和儀器本身的背景信號(hào)。如果用樣品液進(jìn)行空白校正:
1、樣品信號(hào)被錯(cuò)誤扣除:儀器會(huì)將樣品本身的信號(hào)當(dāng)作“背景”扣除。這意味著后續(xù)測(cè)量同種樣品時(shí),得到的將是一個(gè)被嚴(yán)重削弱甚至為負(fù)值的錯(cuò)誤讀數(shù)。
2、所有數(shù)據(jù)失效:一旦用錯(cuò)了空白液,后續(xù)測(cè)量的所有數(shù)據(jù)(濃度、純度比值等)都將失去任何參考價(jià)值,必須全部作廢。
二、解決方案:重新進(jìn)行正確的空白校正并測(cè)量
發(fā)現(xiàn)錯(cuò)誤后,正確的做法就是拋棄錯(cuò)誤數(shù)據(jù),重新測(cè)量。
1、清潔上下基座:使用無(wú)塵軟布(如Kimwipes),蘸取少量去離子水或70%乙醇,單向擦拭上下基座,并讓其干燥。
2、使用正確的空白液重新校正:
(1)在下基座滴加 1-2 μL 與樣品一致的空白液(如TE Buffer)。
(2)放下檢測(cè)臂,點(diǎn)擊軟件中的 “Blank” 按鈕。
(3)完成后,抬起檢測(cè)臂,用干凈的無(wú)塵布擦凈基座。
3、重新測(cè)量所有樣品:完成正確的空白校正后,再點(diǎn)樣測(cè)量你的所有樣品。
三、如何避免再次發(fā)生
1、養(yǎng)成良好習(xí)慣:操作前,務(wù)必在心理或?qū)嶒?yàn)記錄上明確區(qū)分“空白液”和“樣品液”??梢杂貌煌伾碾x心管或標(biāo)記來(lái)區(qū)分。
2、善用自動(dòng)功能:NanoDrop Ultra C具備“自動(dòng)空白檢測(cè) (Auto-Blank)”功能。開啟后,放下檢測(cè)臂儀器便會(huì)自動(dòng)執(zhí)行空白校正,能有效避免人為錯(cuò)誤。
3、注意溶劑一致性:確??瞻兹芤号c樣品溶解液一致。每次更換緩沖液后,都必須用對(duì)應(yīng)的新空白液重新進(jìn)行空白校正。
4、利用內(nèi)置診斷:NanoDrop Ultra C的高分辨率攝像頭會(huì)自動(dòng)拍攝液柱狀態(tài),Acclaro技術(shù)也能在樣品異常時(shí)發(fā)出預(yù)警,注意觀察這些提示。



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