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2023-12-18 15:48:34
作者: 高思維醫(yī)療
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一、伯樂Trans-Blot SD型半干轉(zhuǎn)印系統(tǒng)的轉(zhuǎn)印操作步驟如下:
1、根據(jù)凝膠平衡、三明治裝置、電泳過程等所需要的緩沖液用量準(zhǔn)備足夠的緩沖液。
2、使用去離子水浸潤凝膠,并在轉(zhuǎn)印緩沖液中平衡15min。所用凝膠須在緩沖液中平衡,除去電泳過程中所帶的鹽分。在轉(zhuǎn)印過程中,這些鹽會引起轉(zhuǎn)印緩沖液導(dǎo)電性升高,產(chǎn)生大量的焦耳熱。
3、相對于每一張凝膠,需要按尺寸裁減出一張印記膜、兩到六張濾紙。
4、在電轉(zhuǎn)印緩沖液中潤濕濾紙。
5、將印記膜放入電轉(zhuǎn)印緩沖液中平衡。組裝三明治結(jié)構(gòu)前,膜必須全部浸潤。硝酸纖維素膜可直接在轉(zhuǎn)印緩沖液中平衡;首先PVDF膜需要100%甲醇浸潤后,再在緩沖液中平衡。
6、小心打開安全蓋,取下陰極裝置。
7、將預(yù)先潤濕的超厚濾紙平房在陽極板上,用滾筒驅(qū)趕氣泡。如果使用厚或薄的濾紙,則疊加2~3張濕潤的濾紙,并驅(qū)趕氣泡。
8、將預(yù)先浸潤的印記膜小心放在濾紙上,驅(qū)趕氣泡。
9、將平衡后的凝膠放在印記膜上,將凝膠放在印記膜中央,如果凝膠超出印記膜外有所偏離,將不能達(dá)到全部轉(zhuǎn)印,要裁剪同樣尺寸的印記膜和濾紙。放置后盡量不要移動轉(zhuǎn)印膜,以防止產(chǎn)生玷污印記和10、人為印跡。用滾筒驅(qū)趕氣泡,使凝膠和印記膜完全接觸。
11、在凝膠上方放入另外一塊潤濕后的超厚濾紙;如果使用厚或薄的濾紙,則疊放2~3張潤濕后的濾紙,并驅(qū)趕氣泡。擦干凝膠/印跡膜三明治結(jié)構(gòu)外過量的緩沖液,以防止電流泄漏。
小心蓋上陰極蓋。
12、加蓋裝置的安全蓋。
13、接通電源,設(shè)置電泳儀參數(shù),開始轉(zhuǎn)印過程。
14、轉(zhuǎn)印結(jié)束后關(guān)閉電源,取下轉(zhuǎn)印夾,拆卸凝膠三明治裝配,用ddH2O清洗印記膜,確保膜上無剩余凝膠和樣品,之后進(jìn)行樣品檢測、成像。

二、伯樂Trans-Blot SD的特點(diǎn)包括:
1、能在15~60分鐘內(nèi)完成快速、高效的轉(zhuǎn)印。
2、需要的緩沖液量少,且緩沖液只限于凝膠三明治的濾紙上。
3、能轉(zhuǎn)移多塊凝膠,凝膠可并排或疊放。
4、簡單的閉鎖設(shè)計,方便快速裝配。
5、板式電極含有涂有鉑金的鈦正極和不銹鋼負(fù)極,能提供均勻可靠的轉(zhuǎn)印,且經(jīng)久耐用。
6、陽極平臺裝有4個彈簧,能使平臺容納不同厚度的疊置凝膠,并在轉(zhuǎn)印過程中對轉(zhuǎn)印三明治產(chǎn)生均一壓力。
7、獨(dú)特的瓊脂糖凝膠支持框能從瓊脂糖凝膠上轉(zhuǎn)印DNA和RNA。
8、無需其他半干轉(zhuǎn)印儀用于防止電極短路的塑料板。
9、提起安全蓋時,電流被切斷,能防止電擊,保護(hù)使用者。
10、除了Western轉(zhuǎn)印雜交,Trans-Blot SD轉(zhuǎn)印槽也能運(yùn)用獨(dú)特的瓊脂糖凝膠半干轉(zhuǎn)印支持框架轉(zhuǎn)印DNA和RNA??蚣苣鼙Wo(hù)易碎的瓊脂糖凝膠免受電極壓力。




