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CFX? 96  Touch Real-Time PCR 檢測系統(tǒng)快速操作指南

確認系統(tǒng)數(shù)據(jù)線和電源線連接正常后，打開CFX 96電源開關(guān)，系統(tǒng)進入自檢。

自檢完成后啟動CFX Maestro軟件，軟件將自動搜索設(shè)備，完成連接后“Detected Instruments”列表出現(xiàn)設(shè)備名稱，PCR儀器屏幕顯示紅色“Under remote control”文字。

點擊“Experiment setup ”彈出實驗設(shè)置選項。

標簽下，“Create New”可新建熱循環(huán)程序，“Select Existing”可調(diào)用已有熱循環(huán)程序，“Express load”下拉菜單中可選擇各種標準熱循環(huán)程序，“Edit Selected”可對選中的熱循環(huán)程序進行編輯。
4.1　新建或編輯熱循環(huán)程序時，可在圖形或文字區(qū)域輸入各步驟設(shè)定溫度、時間值。
4.2　：插入一個普通溫控步驟；
4.3　：插入溫度梯度步驟；
4.4  ：插入熱循環(huán)范圍，須在插入后輸入循環(huán)起始步驟和循環(huán)次數(shù)；
4.5  ：插入熔解曲線分析步驟；
4.6  ：插入熒光采集步驟；
4.7  ：對當前溫控步驟的變溫速率及方式進行調(diào)節(jié)；
4.8  ：刪除當前溫控步驟；
4.9  里應(yīng)輸入PCR反應(yīng)液體積（此例為25微升）
4.10  編輯好熱循環(huán)程序后點擊OK保存。

確定熱循環(huán)程序后點擊“Next”或標簽進入樣品位置及類型設(shè)定?！癈reate New”可新建樣品設(shè)置，“Select”可調(diào)用已有樣品設(shè)置，“Express load”下拉菜單可選擇各種標準樣品設(shè)置，“Edit Selected”可對選中的熱循環(huán)程序進行編輯。新建和編輯按下面步驟進行：
5.1  從里選擇熒光掃描模式，“SYBR/FAM Only”為單通道快速掃描模式，適用于僅使用核酸染料或/和FAM標定探針的情況?！癆ll Channels”為全通道掃描模式，適用于任何檢測情況。“FRET”模式使用于特殊的FRET探針的情況。
5.2  點擊，可在彈出的對話框里選擇與檢測方法一致的熒光素。注意“SYBR/FAM only”模式下只有FAM/SYBR可用。
5.3  選擇欲使用的樣品孔位置后，在下拉菜單里指定樣品類型，此例為standard標準品。
5.4  在打勾，為所選樣品指定熒光類型（此例為SYBR），根據(jù)實驗需要，還可在后面的輸入擴增基因名稱。
5.5  根據(jù)需要可在為輸入所選樣品孔位的樣品名稱。
5.6  如果樣品設(shè)置有重復，可在里逐一指定，或者點擊快速設(shè)置重復。中分別填入重復的數(shù)量以及起始重復編號，可指定重復放置的方向，點擊即可。
5.7  如果設(shè)置了標準品，需要為標準品賦值，可在中逐一輸入，或者點擊快速設(shè)定。
5.8  可為相對定量數(shù)據(jù)分析時指定內(nèi)參基因和control組的名稱。
5.9  可解除所選樣品的重復設(shè)置狀態(tài)。
5.10 可刪除當前選定的樣品孔設(shè)置。
5.11 有疑問可點擊，參考在線幫助。
5.12 編輯好板位文件后，點OK保存。

確定樣品設(shè)置后點擊“Next”或者準備運行系統(tǒng)。點擊設(shè)備自動打開樣品槽，按照設(shè)置好的樣品位置放置好樣品，然后點擊關(guān)閉樣品槽。熱蓋閉合后點擊，設(shè)備詢問數(shù)據(jù)存放的位置，確定后開始運行。

程序運行時可對PCR程序循環(huán)數(shù)、樣品類型進行實施再編輯，也可編輯新的實驗方案或者分析數(shù)據(jù)。

注意事項：

設(shè)備長時間停用時請勿將樣品槽打開閑置，以免灰塵在樣品槽上長期積累，影響熱傳遞。

樣品槽開閉時讓設(shè)備自由運行，不得強行人為掰開或壓合。

不可同時使用不同規(guī)格的耗材。

避免意外斷電，建議為設(shè)備配置在線式UPS系統(tǒng)。

程序未結(jié)束前不得關(guān)閉系統(tǒng)電源，不得帶電扳動設(shè)備背后的鎖定桿。

PCR運行時不要搬動設(shè)備，若需要長途運輸務(wù)必先將設(shè)備設(shè)置為運輸狀態(tài)，正確打包（可以聯(lián)系BIO-RAD工程師及相關(guān)專業(yè)人士）

系統(tǒng)電腦專人管理，制定儀器的合理管理制度嚴防電腦病毒感染，保證電腦系統(tǒng)的正常運行。