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第三代PCR技術(shù)，數(shù)字PCR是真正的絕對定量技術(shù)。其生化反應(yīng)原理與實(shí)時定量PCR相同，但是它的擴(kuò)增過程是將一個反應(yīng)劃分為成千上萬個并行的反應(yīng)單元分開進(jìn)行，即微分化反應(yīng)體系，這極大地避免了PCR抑制劑的干擾及相似模板之間的競爭性抑制，使檢測的性得到更進(jìn)一步的提升。

Bio-rad微分化過程采用專有的微流控技術(shù)形成油包水微滴，將一份樣品分成數(shù)萬個納升級的微滴，核酸分子在各微滴中隨機(jī)分裝，每個微滴或不含待檢核酸靶分子，或者含有至少一個待檢核酸靶分子，且每個微滴都是一個獨(dú)立的 PCR 反應(yīng)器。經(jīng) PCR 擴(kuò)增后，微滴分析儀逐個對每個微滴進(jìn)行檢測，判定其陰陽性，Z終根據(jù)泊松分布原理以及陽性微滴的比例，分析軟件可直接給出待檢靶分子的拷貝數(shù)濃度。

如此檢測方式大大提高了核酸序列檢測的靈敏度和精準(zhǔn)度，由于擴(kuò)增前的微滴化處理步驟，使得該技術(shù)能夠以絕對定量的方式直接“數(shù)”出靶分子的個數(shù)，從而實(shí)現(xiàn)絕對定量分析。該技術(shù)在腫瘤液體活檢、無創(chuàng)產(chǎn)前篩查、病毒載量分析，以及單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄本定量等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。

一、BIO-RAD數(shù)字PCR設(shè)備

BIO-RAD在數(shù)字PCR領(lǐng)域耕耘多年，設(shè)備裝機(jī)量及文獻(xiàn)發(fā)表量眾多。具有滿足不同通道數(shù)、樣本量及自動化程度的多款設(shè)備型號。

QX600微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)可提供先進(jìn)的六色多重技術(shù)，具備極高準(zhǔn)確度、重現(xiàn)性和靈敏度。應(yīng)用于稀有突變檢測、基因表達(dá)分析、基因組編輯檢測、拷貝數(shù)變異分析、多重突變篩選、病毒滴度定量、污染測試，以及病原體檢測等。

特點(diǎn)：

1、靈敏的多重檢測

（1）六色檢測通道（FAM、HEX、Cy5、Cy5.5、ROX和ATTO 590）

（2）單孔中可定量多達(dá)12個靶標(biāo)

（3）0.1% 或更高靈敏度的絕對定量方法

2、準(zhǔn)確且可重現(xiàn)的結(jié)果

（1）系統(tǒng)經(jīng)過澳大利亞國家計(jì)量研究院（NMI）標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)證，結(jié)果可信度高

3、功能強(qiáng)大的軟件

（1）用戶友好型軟件

（2）高級版軟件具有符合美國FDA 21 CFR第11部分規(guī)定的審計(jì)跟蹤和工具

（3）全系列兼容

（4）兼容TaqMan和EvaGreen染料法

（5）可與QX200檢測試劑和耗材兼容

（6）可在現(xiàn)有ddPCR檢測試劑的基礎(chǔ)上進(jìn)行擴(kuò)展檢測

二、QX200 ddPCR系統(tǒng)

兩通道微滴式數(shù)字 PCR系統(tǒng)，采用 EvaGreen 或 TaqMan 水解探針，可對靶 DNA 或 RNA 分子進(jìn)行絕對定量分析。它具有無與倫比的靈敏度和精確度，適用于多種應(yīng)用。

特點(diǎn)：

（1）Z準(zhǔn)確、Z靈敏的數(shù)字 PCR 解決方案，具有廣泛的應(yīng)用

（2）靈活的數(shù)字 PCR 化學(xué)方法，已針對 TaqMan 水解探針和 EvaGreen 測定進(jìn)行優(yōu)化

（3）靈活的測定設(shè)置，可通過擴(kuò)展實(shí)現(xiàn)高度的靈敏性或較大的通量

（4）簡便而易用的工作流程，通量達(dá) 96 個樣品

（5）QX200 Droplet Digital 技術(shù)的微滴劃分功能可減少擴(kuò)增效率和 PCR 抑制劑的影響

（6）便捷的測定設(shè)計(jì)，不需要標(biāo)準(zhǔn)曲線

三、AutoDG 全自動微滴發(fā)生器

AutoDG 全自動微滴發(fā)生器可配合QX200或QX600 微滴分析儀進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，提供自動化高通量的微滴生成。

特點(diǎn)：

（1）簡化了 ddPCR 工作流程 

（2）Z大限度減少手工操作步驟

（3）消除不同實(shí)驗(yàn)人員之間的操作差異

（4）30 分鐘內(nèi)完成 96 個樣品的微滴生成

（5）靈活的反應(yīng)板設(shè)置(每 8 孔遞增)

（6）彩色觸摸屏方式編程

（7）HEPA 過濾，減少污染

四、全自動微滴式數(shù)字 PCR

全自動微滴式數(shù)字 PCR ：QX ONE ddPCR 系統(tǒng)將標(biāo)準(zhǔn) ddPCR 工作流（微滴生成、熱循環(huán)和微滴讀?。o縫集成到一個儀器中，全程無人值守。

特點(diǎn)：

1、高通量

（1）自動化、無人值守的操作

（2）完全集成的儀器和耗材,微滴生成、微滴 PCR 和數(shù)據(jù)讀取在一塊 96 孔板中進(jìn)行

（3）多板裝載能力,可隨時裝板，可連續(xù)運(yùn)行

（4）儀器試劑用量監(jiān)控，可運(yùn)行中更換

2、高階多重功能

（1）四色高階多重檢測與分析功能 

（2）ddPCR 多重預(yù)混液

3、無縫整合

（1）兼容現(xiàn)有的Bio-Rad ddPCR 預(yù)混液和檢測試劑盒

（2）兼容探針法 PCR 實(shí)驗(yàn)

（3）軟件有符合美國FDA 21 CFR Part 11合規(guī)操作的安全版