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2024-08-08 10:22:23
作者: 高思維醫(yī)療
19763
TBS(Tris緩沖鹽水)、 TBST(含Tween 20的Tris緩沖鹽水)、 PBS(磷酸鹽緩沖液) 和 PBST(含Tween 20的磷酸鹽緩沖液) 是生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的緩沖溶液,它們各自有不同的用途、共同點(diǎn)和區(qū)別。
一、TBS(Tris緩沖鹽水)
1、定義:TBS,即Tris緩沖鹽水,是Tris-HCl緩沖鹽溶液的簡稱。組成:TBS主要由三羥甲基氨基甲烷(Tris)和氯化鈉(NaCl)組成。其中,Tris提供緩沖能力,能夠維持溶液在一定pH范圍內(nèi)的穩(wěn)定性;NaCl則有助于調(diào)節(jié)溶液的滲透壓,使其接近生理?xiàng)l件。
2、主要用途:
TBS:通常用于模擬生理?xiàng)l件,pH值呈弱堿性,廣泛用于免疫測定、免疫組織化學(xué)染色、原位雜交、Western blot等實(shí)驗(yàn)中作為洗滌緩沖液或抗體稀釋劑。
3、每1000ml配方:
TBS (Tris-Buffered Saline) 配方:6.05克 Tris base 85.0克 氯化鈉 (NaCl) 用HCl調(diào)整pH值至7.4-7.6
二、TBST(含Tween 20的Tris緩沖鹽水)
TBST(含Tween 20的Tris緩沖鹽水)是一種在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的緩沖溶液,它主要用于增強(qiáng)洗滌效果,特別是在Western Blotting等實(shí)驗(yàn)中。
1、定義:TBST是在TBS(Tris緩沖鹽水)的基礎(chǔ)上添加了Tween 20這一成分而得到的緩沖溶液。組成:TBST主要包含Tris(三羥甲基氨基甲烷)、NaCl(氯化鈉)和Tween 20。其中,Tris和NaCl構(gòu)成基本的緩沖鹽溶液,而Tween 20則是一種非離子型表面活性劑,能夠增強(qiáng)洗滌效果。
2、主要用途:
TBST:在TBS的基礎(chǔ)上添加了Tween 20,增強(qiáng)了洗滌能力,常用于Western blot實(shí)驗(yàn)中洗滌膜以去除非特異性結(jié)合的抗體。
3、每1000ml配方:
TBST (Tris-Buffered Saline with Tween-20) 配方:與TBS相同,加上: 1ml
三、PBS(磷酸鹽緩沖液)
PBS(Phosphate Buffered Saline),即磷酸鹽緩沖液,是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中廣泛使用的一種緩沖溶液。
1、定義:PBS是一種以磷酸鹽為主要成分的緩沖溶液,用于維持生物樣品或?qū)嶒?yàn)體系中的pH穩(wěn)定和滲透壓平衡。組成:PBS的主要成分包括磷酸二氫鉀(KH2PO4)、磷酸氫二鈉(Na2HPO4)、氯化鈉(NaCl)以及有時(shí)還包括氯化鉀(KCl)。這些成分的比例可以根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行調(diào)整,以達(dá)到所需的pH值和滲透壓。
2、主要用途:
pH值相對穩(wěn)定,常用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、免疫染色等作為緩沖液或者洗滌液。
3、每1000ml配方:
配方:1.42克 磷酸二氫鈉 (NaH2PO4) 8.77克 磷酸氫二鈉 (Na2HPO4) 90.0克 氯化鈉 (NaCl) 用NaOH調(diào)整pH值至7.2-7.4。
四、PBST(含Tween 20的磷酸鹽緩沖液)
PBST(含Tween 20的磷酸鹽緩沖液)是一種在生物學(xué)實(shí)驗(yàn)和研究中廣泛使用的混合溶液,主要由磷酸鹽緩沖液(PBS)和Tween-20組成。
1、定義:PBST是在PBS的基礎(chǔ)上添加了Tween-20這一非離子型去污劑而得到的混合溶液。組成:PBST的主要成分包括磷酸鹽緩沖液(PBS)和Tween-20。PBS通常由磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉、氯化鈉以及有時(shí)還包括氯化鉀等鹽類組成,用于維持溶液的pH穩(wěn)定和滲透壓平衡。Tween-20則是一種表面活性劑,具有乳化、潤濕、分散和增溶等多種功能。
2、主要用途:
所有這些緩沖液都用于生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中的洗滌步驟,目的是去除未結(jié)合的試劑,降低背景噪聲,提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的信噪比。它們都含有維持溶液等滲的氯化鈉(NaCl)成分。
3、每1000ml配方:
PBST (Phosphate-Buffered Saline with Tween-20) 配方:與PBS相同,加上: 1ml Tween-20
五、共同點(diǎn):
所有這些緩沖液都用于生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中的洗滌步驟,目的是去除未結(jié)合的試劑,降低背景噪聲,提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的信噪比。它們都含有維持溶液等滲的氯化鈉(NaCl)成分。
六、區(qū)別:
成分上:TBS和TBST基于Tris,而PBS和PBST基于磷酸鹽。TBST和PBST添加了Tween 20以增強(qiáng)洗滌效果,但TBS和PBS沒有。pH穩(wěn)定性:PBS的pH值相對穩(wěn)定,而TBS的pH值隨溫度變化較大。



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