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2024-09-14 10:39:21
作者: 高思維醫(yī)療
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一、手動(dòng)操作
1、主屏幕:
(1)按 Enter 鍵選擇指數(shù)衰減;
(2)按2,然后按Enter 鍵選擇指數(shù)衰減,但指定時(shí)間常數(shù);
(3)按3,然后按Enter 選擇方波。
2、使用向上和向下箭頭鍵滾動(dòng)瀏覽屏幕上的參數(shù)值。當(dāng)參數(shù)值高亮顯示時(shí),使用鍵盤(pán)輸入一個(gè)值,然后按 Enter 。
3、輸入設(shè)定的參數(shù)值后,Gene Pulser Xcell 上的脈沖按鈕將處于活動(dòng)狀態(tài)。屏幕右下角“P”閃爍狀態(tài)。
4、按脈沖按鈕對(duì)樣品進(jìn)行電穿孔。
5、按返回鍵返回到“協(xié)議詳細(xì)信息”屏幕并發(fā)送另一個(gè)脈沖。
二、使用預(yù)設(shè)Protocol界面操作
1、在主屏幕上,按 4,然后按 Enter 鍵以顯示預(yù)設(shè)協(xié)議屏幕。
2、按 1–3 在細(xì)菌、真菌或哺乳動(dòng)物細(xì)胞之間進(jìn)行選擇;按 Enter 鍵選擇生物體類(lèi)型并顯示生物體列表。
3、按協(xié)議旁邊的數(shù)字將其突出顯示。按 Enter 鍵選擇并顯示“協(xié)議詳細(xì)信息”屏幕。
4、按脈沖按鈕對(duì)樣品進(jìn)行電穿孔。
5、按返回鍵返回到“協(xié)議詳細(xì)信息”屏幕并發(fā)送另一個(gè)脈沖。
三、使用用戶(hù)協(xié)議
1、在主屏幕上,按 5,然后按 Enter 鍵打開(kāi)“用戶(hù)協(xié)議”菜單并顯示第一個(gè)“用戶(hù)目錄”屏幕。
2、按 1–12 突出顯示所需的名稱(chēng);按 Enter 鍵選擇該名稱(chēng)以顯示第一個(gè)用戶(hù)協(xié)議屏幕。
3、按 1–12 突出顯示所需的協(xié)議名稱(chēng);按 Enter 鍵選擇該協(xié)議并顯示“協(xié)議詳細(xì)信息”屏幕。Gene Pulser Xcell 上的脈沖按鈕現(xiàn)已激活。
4、按脈沖按鈕對(duì)樣品進(jìn)行電穿孔。
5、按返回鍵返回到“協(xié)議詳細(xì)信息”屏幕并發(fā)送另一個(gè)脈沖。
四、Gene Pulser Xcell 的預(yù)設(shè)協(xié)議
1、預(yù)設(shè)協(xié)議的特點(diǎn)
(1)優(yōu)化程序:Gene Pulser Xcell 系統(tǒng)為各種細(xì)胞類(lèi)型預(yù)設(shè)了經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的轉(zhuǎn)化程序,這些程序基于Bio-Rad在電轉(zhuǎn)化技術(shù)上的多年經(jīng)驗(yàn)積累,能夠確保高效的轉(zhuǎn)化效率和細(xì)胞存活率。
(2)快速選擇:用戶(hù)可以通過(guò)簡(jiǎn)單的操作快速選擇預(yù)設(shè)程序,無(wú)需手動(dòng)設(shè)置復(fù)雜的參數(shù),從而節(jié)省了時(shí)間并降低了操作難度。
(3)可調(diào)整性:盡管系統(tǒng)提供了預(yù)設(shè)程序,但用戶(hù)仍然可以根據(jù)需要對(duì)手工編程的所有參數(shù)進(jìn)行修改或直接編輯,以適應(yīng)不同的實(shí)驗(yàn)條件或細(xì)胞類(lèi)型。
2、預(yù)設(shè)協(xié)議的內(nèi)容
(1)電場(chǎng)強(qiáng)度(kV/cm):描述電擊杯外界電場(chǎng)環(huán)境的一個(gè)參數(shù),直接影響電穿孔的效果。
(2)時(shí)間常數(shù)(ms):在指數(shù)波模式下,用于衡量脈沖時(shí)間的一個(gè)參數(shù),與電阻和電容的大小有關(guān)。
(3)脈沖時(shí)間:細(xì)胞被放電的時(shí)間,對(duì)于方波模式來(lái)說(shuō)是一個(gè)重要的參數(shù)。
(4)脈沖次數(shù):在方波模式下,脈沖可以被反復(fù)釋放的次數(shù)。
(5)脈沖間隔時(shí)間:兩個(gè)脈沖之間的間隔時(shí)間,也是方波模式下的一個(gè)重要參數(shù)。
3、預(yù)設(shè)協(xié)議的使用
(1)選擇預(yù)設(shè)程序:在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,用戶(hù)可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮图?xì)胞類(lèi)型選擇相應(yīng)的預(yù)設(shè)程序。
(2)驗(yàn)證和調(diào)整:雖然預(yù)設(shè)程序已經(jīng)過(guò)優(yōu)化,但用戶(hù)仍然可以在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中根據(jù)需要進(jìn)行驗(yàn)證和調(diào)整,以確保Z佳的實(shí)驗(yàn)效果。
(3)執(zhí)行實(shí)驗(yàn):按照預(yù)設(shè)程序設(shè)置的參數(shù)執(zhí)行實(shí)驗(yàn),并記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以供后續(xù)分析。


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