RM新时代平台网址

選擇StepOnePlus?實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)時(shí)，需要了解以下幾個(gè)關(guān)鍵參數(shù)，以確保它能夠滿(mǎn)足您的實(shí)驗(yàn)需求。這些參數(shù)可以分為兩大類(lèi)：系統(tǒng)硬件性能參數(shù)和實(shí)驗(yàn)應(yīng)用相關(guān)參數(shù)。

一、賽默飛StepOnePLus實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)性能參數(shù)

1、檢測(cè)通道和濾光片

（1）關(guān)鍵點(diǎn)：StepOnePlus是四色通道系統(tǒng)。這意味著它可以同時(shí)檢測(cè)Z多四種不同的熒光信號(hào)。

（2）檢測(cè)方法：如果您使用TaqMan探針（如FAM, VIC）或SYBR Green染料法，需要確認(rèn)染料/探針的熒光基團(tuán)是否與儀器的濾光片波長(zhǎng)匹配。StepOnePlus的標(biāo)配通道通常能覆蓋FAM, SYBR Green, VIC/JOE, NED/TAMRA/Cy3, ROX?等常用熒光基團(tuán)。

（3）多重檢測(cè)能力：如果您需要在一個(gè)反應(yīng)孔里同時(shí)檢測(cè)多個(gè)靶基因（多重PCR），四通道的限制就很重要。例如，一個(gè)通道用于內(nèi)參基因，那么Z多還能檢測(cè)三個(gè)目標(biāo)基因。

2、通量

（1）關(guān)鍵點(diǎn)：StepOnePlus采用96孔板標(biāo)準(zhǔn)格式。

（2）樣本數(shù)量：您一次實(shí)驗(yàn)Z多需要運(yùn)行多少個(gè)樣本？包括標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本、陰性對(duì)照等。96孔板除去對(duì)照，通常一次運(yùn)行可處理80-90個(gè)樣本。

（3）實(shí)驗(yàn)規(guī)劃：如果您的樣本量經(jīng)常接近或超過(guò)96個(gè)，可能需要考慮更高通量的儀器（如Applied Biosystems 384孔或更高通量的系統(tǒng)），或者接受分批次運(yùn)行，這會(huì)增加時(shí)間和試劑成本。

3、動(dòng)態(tài)范圍

（1）關(guān)鍵點(diǎn)：指儀器能夠準(zhǔn)確定量從低濃度到高濃度模板的范圍，通常用數(shù)量級(jí)表示（例如，10個(gè)數(shù)量級(jí)）。

（2）需要了解：StepOnePlus具有很寬的動(dòng)態(tài)范圍（通?？蛇_(dá)10個(gè)數(shù)量級(jí)），這對(duì)于準(zhǔn)確量化拷貝數(shù)差異巨大的樣本（如病毒載量檢測(cè)、基因表達(dá)高低懸殊的樣本）至關(guān)重要。

4、靈敏度

（1）關(guān)鍵點(diǎn)：指儀器能夠檢測(cè)到的Z低模板拷貝數(shù)。

（2）需要了解：如果您的研究涉及痕量核酸的檢測(cè)（如微量病原體、低豐度基因表達(dá)、循環(huán)腫瘤DNA等），高靈敏度是首要考慮因素。StepOnePlus的靈敏度很高，通常可以檢測(cè)到單拷貝的模板。

二、賽默飛StepOnePlus實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)應(yīng)用相關(guān)參數(shù)

1、溫控系統(tǒng)和升溫速率

（1）關(guān)鍵點(diǎn)：StepOnePlus使用半導(dǎo)體帕爾貼技術(shù)進(jìn)行溫控。

（2）溫控精度和均一性：這直接影響PCR擴(kuò)增的效率性和特異性，確保所有反應(yīng)孔的條件一致，結(jié)果可靠。

（3）升溫速率：更快的升溫速率可以縮短實(shí)驗(yàn)周期。StepOnePlus的速率屬于標(biāo)準(zhǔn)水平，適合絕大多數(shù)常規(guī)qPCR實(shí)驗(yàn)。如果您對(duì)實(shí)驗(yàn)速度有極高要求，可以考慮更快速的機(jī)型。

2、軟件功能和分析能力

（1）關(guān)鍵點(diǎn)：配套的StepOne? Software是操作儀器和分析數(shù)據(jù)的核心。

（2）用戶(hù)界面：是否易于上手，進(jìn)行程序設(shè)置、板面定義和運(yùn)行監(jiān)控。

（3）數(shù)據(jù)導(dǎo)出：能否方便地將原始數(shù)據(jù)（Ct值等）導(dǎo)出到其他專(zhuān)業(yè)分析軟件（如Excel, GraphPad Prism）進(jìn)行進(jìn)一步處理。

3、兼容性

（1）關(guān)鍵點(diǎn)：儀器對(duì)耗材和試劑的兼容性。

（2）耗材：是否必須使用原廠的昂貴PCR板/蓋膜，還是兼容其他品牌的低成本耗材（需確認(rèn)光學(xué)兼容性）。

（3）試劑：系統(tǒng)是開(kāi)放式的，可以使用任何品牌的qPCR試劑（TaqMan或SYBR Green），這給了您更大的選擇和成本控制空間。

三、總結(jié)選擇建議

StepOnePlus是一款非常成熟、穩(wěn)定且用戶(hù)友好的中端qPCR儀。它非常適合以下用戶(hù)：

1、進(jìn)行基因表達(dá)分析、病原體檢測(cè)、SNP分型等常規(guī)qPCR實(shí)驗(yàn)的學(xué)術(shù)實(shí)驗(yàn)室或臨床檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室。

2、樣本通量在96孔板范圍內(nèi)。

3、注重實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。

4、希望平衡儀器性能與長(zhǎng)期使用成本。

在選擇前，Z好能結(jié)合您的具體實(shí)驗(yàn)需求，與供應(yīng)商的技術(shù)支持詳細(xì)溝通，甚至可以要求進(jìn)行樣本測(cè)試，以Z直觀地驗(yàn)證StepOnePlus是否滿(mǎn)足您的要求。