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2025-11-04 09:20:55
作者: 高思維醫(yī)療
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這是一個非常經(jīng)典和普及的qPCR平臺,其耗材和試劑生態(tài)系統(tǒng)非常成熟??偟膩碚f,您需要準(zhǔn)備以下幾大類:
一、賽默飛QuantStudio3實(shí)時熒光定量PCR儀核心耗材
1、微孔板
0.2 mL 96孔板:這是Z常用的格式。有單孔獨(dú)立式和8聯(lián)排管式。
材質(zhì):通常為聚丙烯,確保熱傳導(dǎo)效率和化學(xué)兼容性。
選擇建議:
標(biāo)準(zhǔn)板:用于大多數(shù)實(shí)驗(yàn)。
光學(xué)透明封口膜:必須與板配套使用,密封板子以防止蒸發(fā)和污染。有預(yù)切割的粘性膜和熱封膜兩種。
8聯(lián)排管:靈活性高,適合樣本數(shù)量不多的實(shí)驗(yàn),可以單獨(dú)使用每個排管。
2、基座和托架
標(biāo)準(zhǔn)96孔基座:隨儀器標(biāo)配,用于放置0.2 mL的96孔板或8聯(lián)排管。
96孔板透明托架:如果您使用獨(dú)立的8聯(lián)排管,需要將這個托架放入基座中,以固定排管的位置。
二、賽默飛QuantStudio3實(shí)時熒光定量PCR儀核心試劑
1、染料法
染料(如SYBR Green)會嵌入所有雙鏈DNA中發(fā)出熒光,成本較低,使用簡便。
推薦賽默飛品牌:
PowerUp? SYBR? Green Master Mix:這是目前的主力產(chǎn)品,包含了所有必需組分(熱啟動Taq酶、dNTPs、緩沖液、SYBR Green染料、ROX校正染料等),即開即用,性能穩(wěn)定。
SYBR? Select Master Mix:另一款高性能的預(yù)混液,同樣包含所有組分。
關(guān)鍵點(diǎn):QuantStudio 3需要使用ROX作為被動參比染料來校正孔與孔之間的熒光信號誤差。上述預(yù)混液都已包含ROX,無需額外添加。
2、探針法
使用序列特異性的探針(如TaqMan探針),特異性更高,適合多重檢測。
推薦賽默飛品牌:
TaqMan? Fast Advanced Master Mix:快速循環(huán)預(yù)混液,能顯著縮短實(shí)驗(yàn)時間,且包含所有組分。
TaqMan? Universal Master Mix II:經(jīng)典的探針法預(yù)混液,適用性廣。
關(guān)鍵點(diǎn):除了預(yù)混液,您還需要向賽默飛或其它供應(yīng)商訂購針對您目標(biāo)基因的特異性TaqMan探針引物套裝。
三、輔助耗材與試劑
1、酶水:用于稀釋引物、配制反應(yīng)體系。必須是分子生物學(xué)級別,無DNA酶、RNA酶。
2、引物:針對您的目標(biāo)基因設(shè)計的特異性引物。
3、模板DNA:您要定量的樣品DNA,通常是反轉(zhuǎn)錄得到的cDNA(如果是RNA定量)。
4、實(shí)驗(yàn)室通用耗材:
移液器及無菌帶濾芯吸頭:確保精確移液和防止氣溶膠污染。
微型離心機(jī):用于離心混勻反應(yīng)液。
渦旋振蕩器。
冰盒:用于放置對溫度的試劑。
手套:防止污染。
四、Z后建議:
1、新手入門:強(qiáng)烈建議從SYBR Green染料法開始,使用PowerUp? SYBR? Green Master Mix 和官方兼容的96孔板,這是Z直接、成本效益Z高的組合。
2、官網(wǎng)渠道:訪問賽默飛世爾科技官網(wǎng),在搜索框中輸入“QuantStudio 3 consumables”或上述試劑名稱,可以找到Z準(zhǔn)確的產(chǎn)品列表、說明書信息。




