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這是一份詳細、專業(yè)的 Mini Trans-Blot? 小型轉印槽技術參數及使用說明書。本說明書綜合了通用操作流程、關鍵參數和注意事項，適用于這類標準垂直槽式濕轉印系統(tǒng)。

一、伯樂Mini Trans-Blot? 小型轉印槽產品概述

Mini Trans-Blot? 小型轉印槽是一種用于 Western Blot（蛋白質免疫印跡）實驗的垂直槽式濕法轉印裝置。其核心功能是在電場作用下，將經過SDS-PAGE凝膠電泳分離的蛋白質，從凝膠上原位、定向地轉印到固相支持膜（如PVDF膜或硝酸纖維素膜）上，以進行后續(xù)的免疫檢測。

二、伯樂Mini Trans-Blot? 小型轉印槽技術參數

凝膠容量：2塊

凝膠尺寸：10 x 7.5

推薦電源：PowerPacBasic或PowerPac Hc

應用：Western雜交、核酸轉印

尺寸：12 x 16 x 18 cm

重量：0.75 kg

緩沖液：450 ml

效率：1小時內轉印2塊10x7.5cm凝膠

轉印凝膠夾：2個可夾10 x 7.5 cm 凝膠

高質量：轉印小型凝膠

型號：1703935、1703930

三、系統(tǒng)組件清單

1、轉印槽主體：帶電極和蓋子的透明槽體。

2、凝膠夾板（“三明治”夾）：一對黑色和透明的塑料夾板，用于固定轉印“三明治”。

3、海綿墊：至少兩塊，用于提供均勻壓力和支持。

4、濾紙墊片：至少兩張，尺寸略大于凝膠和膜。

5、冰盒（冷卻芯）（可選配件）：插入槽內，用于在轉印時降溫。

6、電源導線：紅色（正極，陽極）和黑色（負極，陰極）。

四、操作步驟（濕轉印法）

A、轉印前準備

1、配制緩沖液：根據實驗要求配制足夠的轉印緩沖液（如Tris-甘氨酸緩沖液、Towbin緩沖液等），并預冷至4°C。

2、制備膜和濾紙：將PVDF膜在甲醇中浸泡15秒活化，然后與濾紙、海綿墊一同放入轉印緩沖液中平衡至少15分鐘。

3、制備凝膠：電泳結束后，小心撬開玻璃板，切去濃縮膠和多余部分，將目的蛋白所在的分離膠放入轉印緩沖液中平衡。

B、組裝“三明治”

關鍵原則：始終在盛有緩沖液的托盤中進行，防止夾入氣泡。

1、將凝膠夾板的透明面（陰極側，對應負極）向下打開。

2、依次在夾板上放置：

海綿墊

濾紙

凝膠（正面朝下）

膜（精確對齊覆蓋凝膠，避免移動）

濾紙

海綿墊

3、小心地合上黑色夾板（陽極側，對應正極），確保各層對齊、無氣泡。聽到“咔噠”聲表示夾緊。

4、將組裝好的凝膠夾板插入轉印槽的卡槽中，確保黑色夾板面對紅色正極（陽極），透明夾板面對黑色負極（陰極）。即：凝膠在負極側，膜在正極側（蛋白質帶負電，向正極移動）。

C、進行轉印

1、將轉印槽置于冰水浴中，或連接好外接循環(huán)冷卻水系統(tǒng)。

2、向槽內灌滿預冷的轉印緩沖液，確保浸沒凝膠夾板。

3、蓋上槽蓋，連接電源：紅線接紅端（陽極），黑線接黑端（陰極）。

4、設置電源參數：

恒壓法（常用）：設定 100V，轉印60-90分鐘（分子量標準）。

恒流法：設定 250-300 mA，轉印60-90分鐘。

高分子量蛋白：可采用 30V 恒壓過夜轉印。

5、啟動電源，開始轉印。過程中會產生熱量，必須確保有效的冷卻。

D、轉印后處理

1、轉印結束后，關閉電源，斷開導線。

2、取出凝膠夾板，拆開，用鑷子小心取出膜。

3、用麗春紅S染液或立春紅染膜液快速染色，檢查轉印效率。也可直接進行后續(xù)的封閉和免疫雜交步驟。

五、維護與保養(yǎng)

1、每次使用后，用去離子水清洗所有部件（槽體、夾板、海綿、冰盒等），晾干后保存。

2、避免刮擦電極（鉑金絲），切勿用硬物接觸。

3、定期檢查電極是否腐蝕或斷裂。

4、海綿和濾紙為消耗品，多次使用后若變形或破損應及時更換，以保證壓力均勻。

5、長期不用時，將所有部件干燥存放于清潔處。